摘要: 以风沙土为材料,直接提取土壤微生物DNA。采用SDS-溶菌酶-CTAB-蛋白酶K和液氮反复冻融法裂解细胞得到DNA粗提液,以PEG对其纯化。结果表明,SDS-溶菌酶-CTAB-蛋白酶K和液氮反复冻融法裂解细胞可获得大片段的DNA,提高DNA产率.每克干土的DNA提取量为0.586~1.311μg.所提DNA片段在23Kb以上。PEG可有助于去除DNA中腐植酸,DNA不作回收纯化即可作为模板进行16SrDNA PCR扩增。SDS-溶菌酶-CTAB-蛋白酶K和液氮反复冻融裂解细胞、PEG纯化DNA的方法组合是一种简便的适合风沙土微生物总DNA的提取方法。
关键词: 风沙土;土壤微生物;DNA提取;DNA纯化;PCR扩增