腐植酸专利

一种用于研究醋糟基质中微生物群落结构的总DNA提取方法

发明(设计)人:李萍萍;林英;赵青松;杜道林;王纪章
申请(专利权)人:江苏大学
公开(公告)号:CN103045585B   公开(公告)日:2015-07-08 00:00:00   法律状态:有效

摘要:本发明涉及到一种用于研究醋糟基质中微生物群落结构的总DNA提取方法。本发明先在醋糟基质中加入含有0.5%的β-巯基乙醇和0.5%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的DNA提取缓冲液,并加入蛋白酶K,放置37℃摇床摇30min,使基质中的微生物充分溶解在DNA提取缓冲液中后,用质量分数为20%的十二烷基磺酸钠(SDS)溶液裂解醋糟基质中的微生物细胞,用氯仿:异戊醇(24:1)抽提去除蛋白,用质量分数为2%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)去除腐殖酸、酚类物质后,用预冷的异丙醇沉淀,最后得到高质量的可直接用于PCR扩增的DNA。